Эта технология применяется, главным образом, для быстрого определения
клеточных субпопуляций в периферической крови, тканях и клеточных суспензиях.
Она основана на связывании моноклональных антител, меченных флюорохромами,
к поверхностным клеточным маркёрам, а также на учёте некоторых физических
свойств клеток (размер, наличие гранул в цитоплазме, ядерно-цитоплазматическое соотношение).
Это позволяет изучать клетки и молекулы в потоке капель при использовании источника
лазерного света, генерирующего рассеянные лучи и флюоресцирующие пучки.
Сначала предварительно меченные клетки идентифицируются в прямом рассеянном свете
(что определяет размер клеток), затем под углом 90° (что выявляет наличие гранул),
потом в флюоресцирующем свете (что даёт возможность верифицировать одновременно
много маркёров). Более того, система позволяет сепарировать разные клетки в зависимости
от их физических или специфических свойств.
Гейтирование - это сортировка и анализ данных в многоцветной проточной
цитометрии на основе определения маркеров для интересующей популяции клеток.
Подробнее о цитометрии - см. здесь
©В.В.Климов
|