|
Исследование (immunofluorescence staining) позволяет визуализировать
комплексы антиген-антитело при флюоресцентной микроскопии или в потоке лучей лазера и,
поэтому, используется для иммуногистохимического окрашивания и потоковой цитометрии.
При прямом методе, менее чувствительном, первичные моноклональные антитела, меченные
флюорохромом (например, FITC), реагируют с антигеном в тканях. При 2-хступенчатом
непрямом методе, более чувствительном, меченные вторичные антитела реагируют с
немеченными первичными, которые, в свою очередь, связаны с антигеном в тканях.
Существуют много модификаций многоступенчатого метода, которые используют принцип ИФА.
В комплексе биотин+авидин+энзим авидин (или стрептоавидин), имеющий высокое сродство
к биотину, выступает как мостик между флюорохромом и энзимом, а биотин позволяет
связываться с антителами (biotinylated antibodies).
©В.В.Климов
|
